细菌在实验室种植的最常见方式之一被称为分批培养。在分批培养中,将细菌加入到固定量的液体生长培养基中,含有含有细菌生长的营养物质的溶液,并使其在定义的环境条件下生长。
分批培养中的细菌生长遵循四个阶段的可预测模式:
1.滞后阶段:在添加到新的媒体中,细菌必须立即将其新陈代谢调整到新环境之前,开始生长和分裂。培养物中的细菌数量在该阶段不会改变。
2.日志阶段:细菌积极生长和分裂,文化中细菌的数量呈指数增长。
3.固定阶段:当介质中的必需营养耗尽时,生长大幅减慢,使得培养中的生长速率变慢等于死亡率。文化中的细菌数量不变。
4.死亡阶段:当培养条件不能再持续任何生长时,细菌呈指数增长。
阶段2-4将在每种批量培养中发生足够的时间。然而,如果细菌需要几乎或未对新生物开始繁殖,则可以没有观察到延迟阶段。
进行以下实验以研究影响分批培养物的细菌生长的变量。
实验1
一种用于实验室研究的常见细菌种类的大肠杆菌的分批培养物中营养富含培养基的培养基培养基。当该培养物达到日志阶段时,除去0.5mL液体介质样品并用于接种两个1L烧瓶中的每一个。这些烧瓶中的每一个都包含不同类型的液体生长介质。然后使新培养物在37℃下生长。
通过考虑光学密度的周期性测量或OD来监测培养的生长600,生长媒体。光学密度是测量光线能够通过培养基的易用,并且它与介质中活细菌的浓度直接相关。所得到的测量图1中绘制在图1中。
图1
实验2
用细菌接种八个最小生长培养基的六个烧瓶:四种用大肠杆菌和4种带有P. Aeruginosa的四种。然后在两个条件下在37℃下在37℃下孵育烧瓶 - 或者没有氧气 - 和OD600每小时采取测量以监测增长。
OD后600测量停止上升,细菌与培养基分离并称重。这些测量用于计算转化为生物材料的生长培养基中的生长产率或碳源的百分比。生长产量可用于确定细菌在给定的一组生长条件下能够使用能量。这些计算的结果如表1所示。
表格1
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